8-804-333-71-05
(бесплатно по РФ)
Ваш город: Хьюстон
Зачётик.Ру - каталог студенческих работ.

У нас можно недорого заказать курсовую, контрольную, реферат или диплом

Главная / готовые работы / Дипломные работы / Разное

ПОДБОР МЕТОДОВ СТЕРИЛИЗАЦИИ ДЛЯ ВВЕДЕНИЯ В КУЛЬТУРУ ТКАНЕЙ И ОРГАНОВ БЕЛАМКАНДЫ КИТАЙСКОЙ (BELAMCANDA CHINENSIS (L.) DC) - Дипломная работа

Тип: Дипломная работа
Раздел: Разное
Страниц: 84
Год: 2019

Содержание

ВВЕДЕНИЕ 4

ГЛАВА 1. ОБЗОР НАУЧНОЙ ЛИТЕРАТУРЫ 8

1.1. Общая характеристика вида беламканды китайской Belamcanda chinensis (L.) DC 8

1.1.1. Морфологическое описание 8

1.1.2. Ареал распространения 12

1.1.3. Лекарственные свойства 13

1.2. Размножение беламканды китайской Belamcanda chinensis (L.) DC 15

1.2.1 Размножение семенами 15

1.2.2 Вегетативное размножение с помощью корневища 16

1.2.3 Размножение растений с использованием культуры in vitro 18

1.3. Способы сохранения редких и вымирающих видов 20

1.3.1. Введение растений в культуру тканей и органов как альтернативный способ размножения растений 21

Заключение 24

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 26

2.1. Основные этапы исследования 26

2.2. Создание условий асептики 27

2.2.1. Дезинфекция лабораторных приборов и оборудования 27

2.2.2. Асептическая обработка питательных сред 29

2.2.3. Стерилизация первичных эксплантов 29

2.2.4. Правила работы в стерильных условиях. 31

2.3. Приготовление питательных сред. 32

2.4. Физические факторы культивирования 34

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ОБСУЖДЕНИЯ 35

3.1. Введение в культуру тканей и органов корневищных почек беламканды китайской (Belamcanda chinensis (L.) DС) 35

3.2. Введение в культуру тканей и органов семян беламканды китайской (Belamcanda chinensis (L.) DC) 40

3.3. Подбор состава питательной среды для индуцирования побегообразования. 43

3.4. Особенности процесса онтогенеза в системе in vitro 45

ГЛАВА 4. МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ПРИМЕНЕНИЮ ЭКСПЕРЕМЕНТАЛЬНОГО МАТЕРИАЛА ВЫПУСКНОЙ КВАЛИФИКАЦИОННОЙ РАБОТЫ В ШКОЛЬНОМ КУРСЕ БИОЛОГИИ 49

4.1. Роль биологического образования 49

4.2. Анализ тематического планирования по разделам учебников биологии 51

4.3. Разработка урока на тему «Вегетативное размножение покрытосеменных растений», 6 класс 58

4.4. Применение логико-смысловых моделей в процессе изучения биологии 66

ВЫВОДЫ 70

ЗАКЛЮЧЕНИЕ 72

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 73

ПРИЛОЖЕНИЕ 78

Курсовая работа:
Нобелевская премия в области физиологии и медицины «За открытие способности вируса полиомиелита расти в культурах различных тканей» Джон Ф.Эндерс ,Фредерик Ч.Роббинс,Томас Х.Уэллер(1954)

Дипломная работа:
РАЗВИТИЕ СКОРОСТНО-СИЛОВЫХ КАЧЕСТВ ШКОЛЬНИКОВ 16-17 ЛЕТ

Введение (выдержка)

В настоящее время весьма актуальна проблема сохранения биоразнообразия растений из-за быстрого уменьшения ареалов распространения многих дикорастущих видов в связи с активной хозяйственной деятельностью человека и как следствие вызванные этим климатическими изменениями.

Разработка методов микроклонального размножения является основой для создания генетических банков in vitro редких и исчезающих видов растений, а также одним из перспективных направлений сохранения биоразнообразия в целом. Ботанические сады являются важными центрами по реализации программ изучения, сохранения и воспроизводства ценных и редких видов растений, занесенных в Красные книги.

Эффективность сохранения генофонда растений ex situ может быть повышена путем создания генетических банков меристем, сохранения растительного материала в условиях in vitro (культура изолированных меристем, тканей и органов растений в условиях замедленного роста).

Объектом моей выпускной квалификационной работы является беламканда китайская Belamcanda chinensis (L.) DC. В естественных условиях данный вид можно встретить в Дальневосточном Приморском крае России, в странах Восточной Азии, Индо-Китае и Малайзии. На данный момент растение находится на грани исчезновения. С 1978 г. занесен в Красные книги СССР, РСФСР и России под категорией 1 - растения, находящиеся под угрозой вымирания.

Для сохранения этого вида необходимо полномасштабное исследование процессов онтогенеза в культуре in vitro и подбор условий для введения в стерильную культуру.

Широко известно, что Ирисы подвержены инфекциям патогенных бактерий и грибов. Бактериоз (возбудитель Erwinia ceratovora или Pectobacterium carotovorum) или, как ее еще называют, мягкая гниль корневищ является опасным заболеванием растений. При традиционных методах размножения крайне трудно добиться здорового посадочного материала, так как велика вероятность накопления и передачи инфекции.

Именно поэтому большое значение при введении в культуру in vitro имеют методы стерилизации, которые подбираются в зависимости от видовых особенностей экспланта.

Выращивание беламканды в ботанических садах имеет большое практическое значение, так как растение обладает высокими декоративными качествами. Как декоративное растение Беламканда выращивается в большинстве стран Азии, Юго-Восточной Европы и Америки. В России Беламканда мало известна, хотя была культивирована многими ботаническими садами, в частности в Москве, Санкт-Петербурге, Пензе, Ростове-на-Дону, Самаре, Казани, Ставрополе. Беламканда хорошо прорастает в теплоумеренной зоне средней полосы России и рекомендована в качестве декоративного растения открытого грунта (Родионенко, 1977),

Беламканда считается ценным лекарственным растением в азиатских странах. Она используется при жаре, при воспалении, при мокроте, при отравлении, а также принимают как противомикозное, патогенное, диуретическое и слабительное средство (Растительные ресурсы., 1994). В Китае, Индии и во Вьетнаме беламканда культивируется как ценное лекарственное растение, применяется в виде экстрактов и суспензий. Является одним из важных элементов традиционной китайской медицины.

Беламканда китайская до начала 21 века вид считался единственным представителем рода Belamcanda в результате молекулярно-генетических исследований, проведенных в 2005 году, растение было включено в род Iris ботаником Миссурийского ботанического сада Пе́тером Го́лдблаттом как Iris domestica (L.) Goldblatt & Mabb. (Вяль и др., 2014).

Беламканда китайская давно введена в клеточную культуру и считается испытанным растением, однако практика ее выращивания в ЮУБСИ УФИЦ РАН доказывает, что особенности её развития в условиях, далёких от экологического оптимума были изучены совершенно недостаточно. Особенный интерес представляет изучение семян беламканды, имеющих прямую связь с возможностью генеративного размножения.

Чтобы получить качественный посадочный материал в лаборатории генетики и биотехнологии растений Южно-Уральского ботанического сада-института УФИЦ РАН разрабатываются технологии микроклонального размножения Belamcanda chinensis.

Цель работы: подобрать оптимальные условия для введения в культуру тканей и органов беламканды китайской и изучить этапы ее развития в системе in vitro.

Для достижения цели были поставлены следующие задачи:

1. Выявить наилучший вид первичного экспланта.

2. Определить оптимальную схему стерилизации для фрагментов корневища, корневищных почек и семян, которая позволит получить максимальное количество стерильного и жизнеспособного экспланта.

3. Изучить влияние предстерилизационной обработки фрагментов корневища и корневищных почек на стерильность культуры.

4. Изучить влияние предпосевной обработки семян на жизнеспособность проростков.

5. Подобрать наиболее эффективный состав питательной среды для увеличения коэффициента скорости побегообразования проростков.

6. Изучить начальные процессы развития беламканды китайской в условиях in vitro.

7. Разработать методические рекомендации по использованию теоретического и экспериментального материала ВКР в школе.

Научная новизна работы.

Новизна исследовательской работы заключается в разработке технологии микроклонального размножения беламканды китайской, делая акцент на подборе способов стерилизации и подборе питательных сред для индуцирования морфогенеза. Так же был проведен анализ стерильности и жизнеспособности эксплантов, коэффициента мультипликации и скорости побегообразования, используя различные виды первичного экспланта.

Практическая значимость.

Данная технология позволяет получать стабильные растения-регенеранты для сохранения их в коллекции in vitro. Также эта технология может применяться для быстрого размножения растений для сохранения популяции беламканды как редкого растения.

Апробация.

Работа выполнена в лаборатории генетики и биотехнологии при Южно-Уральском ботаническом саде-институте УФИЦ РАН.

Продуктами выпускной квалификационной работы является статья, опубликованные в сборнике «Вавиловские чтения-2018» посвященный 131-летию со дня рождения академика Н.И.Вавилова: «Онтогенез и начальные этапы размножения беламканды китайской Belamcanda chinensis (L.) DC. В культуре in vitro».

Курсовая работа:
Значение памятников античности для развития духовной культуры современного общества

Курсовая работа:
Метод Халецкого для СЛАУ

Основная часть (выдержка)

На сегодняшний день клональное микроразмножение представляет широкие возможности для сохранения и восстановления численности редких и исчезающих растений. Многие исследователи занимаются проблемами сохранения биоразнообразия представителей рода ирисовых (Iris L.) и, в частности, беламканды китайской (Крамарь, 2008; Маркова и др., 2010; Конькова и др., 2010; Пищева и др., 2012; Тихомирова, 2012; Мухаметвафина и др., 2014; Зарипова и др., 2015).

Растительные системы in vitro являются удобными моделями для исследования сложных механизмов, лежащих в основе пролиферации, клеточной дифференцировки, гистогенеза, органогенеза, соматического эмбриогенеза и регенерации целого организма из культивируемых клеток, обладающих тотипотентностью. В прикладном аспекте на основе знаний о биологии клетки in vitro разрабатываются, меристемные технологии, эмбриокультура, гаплоидные технологии, клеточная селекция, генная и клеточная инженерия (Круглова, 1997; Высоцкий, 1998; Митрофанова, 2007; Журавлёв, Омелько, 2008). Регенерация растениш и морфогенез in vitro являются основополагающими моментами: всей методологии культуры клеток и тканей; в том числе и клонального микроразмножения (Бутенко, 1999).

Несмотря на имеющиеся экспериментальные работы в области изучения процессов морфогенеза и регенерации растений в условиях культуры тканей, для ириса до сих пор остаются недостаточно разработанными системы получения растений in vitro. Это обусловлено отсутствием четких, хорошо воспроизводимых методик, их трудоемкостью, недостатком знаний о морфогенетическом потенциале органов и тканей, а также способах управления морфогенезом для этой культуры.

Изучение поведения эксплантов генеративных органов ириса в культуре in vitro представляет теоретический и практический интерес. Большая часть работ проводится в области эмбриокультуры, а регенерационная способность соматических тканей генеративных органов остаётся сравнительно слабо изученной

Заключение (выдержка)

Беламканда китайская многолетнее травянистое растение семейства Ирисовых, исторической родиной которого является северное побережье Китая. На донный момент популяция беламканды значительно сократилась в следствии антропогенного фактора. Беламканда китайская способна к генеративному размножению, но из-за особенностей условий ареала и высокого уровня физиологического покоя семян в естественных условиях размножение подобным образом практически не встречается. Основной способ размножения – вегетативный, с помощью корневища. Беламканда подвержена инфекциям патогенных бактерий. Мягкая гниль корневищ - часто встречаемое заболевание у ирисовых, возбудителем которой является Pectobacterium carotovorum. При традиционных методах размножения крайне трудно добиться высокой продуктивности посадочного материала, так как велика вероятность накопления и передачи инфекции.

Несмотря на имеющиеся экспериментальные работы в области изучения процессов морфогенеза и регенерации растений в условиях культуры тканей, для ириса до сих пор остаются недостаточно разработанными системы получения растений in vitro. Это обусловлено отсутствием четких, хорошо воспроизводимых методик, их трудоемкостью, недостатком знаний о этапах роста и развития эксплантов в культуре органов и тканей, а также способах управления морфогенезом для этой культуры.

В данной работе были проведены исследования по подбору оптимальной схемы стерилизации корневищных почек и семян, подбору питательных сред для индуцирования морфогенеза проростков, были изучены влияния предстерилизационной обработки корневищных почек антибиотиком и предпосевной обработки семян методом стратификации и скарификации и было изучено развитие беламканда в культуре in vitro.

Требуются дальнейшие исследования по подбору питательных сред с содержанием антибиотиков для более мягкой стерилизации корневищных почек и увеличения их жизнеспособности.

Дипломная работа:
РАЗВИТИЕ ФИЗИЧЕСКИХ КАЧЕСТВ У УЧАЩИХСЯ МЕТОДОМ КРУГОВОЙ ТРЕНИРОВКИ НА УРОКАХ ФИЗИЧЕСКОЙ КУЛЬТУРЫ

Дипломная работа:
ФОРМИРОВАНИЕ ЭТНИЧЕСКОЙ ТОЛЕРАНТНОСТИ У УЧАЩИХСЯ НА УРОКЕ МУЗЫКИ В ПРОЦЕССЕ ИЗУЧЕНИЯ АЗЕРБАЙДЖАНСКОЙ, АРМЯНСКОЙ И ГРУЗИНСКОЙ МУЗЫКАЛЬНОЙ КУЛЬТУРЫ

Литература

1. Абанькина М. Н. Беламканда китайская – Belamcanda chinensis (L.) DC. [Текст]/ Биология редких сосудистых растений советского Дальнего Востока. Владивосток: ДВО РАН, 1990. –С. 52–60.

2. Абанькина М. Н. Некоторые итоги реинтродукции беламканды китайской в Приморье. [Текст]/ Растения в природе и культуре. Владивосток: Дальнаука, 2000. – С. 230–237.

3. Бабикова A.B., Горпенченко Т.Ю., Журавлёв Ю.Н. Растения, как объект биотехнологии // Комаровские чтения, 2007. Вып LV. - С. 184-211.

2. Батыгина Т.Б., Всильева В.Е., Маметьева Т.Б. Проблемы морфогенеза in vitro и in vivo. Эмбриогенез у покрытосеменных растений // Бот. журнал, 1978. Т. 63. — №1.-С. 87-110.

3. Т.Б., Васильева В.Е. Размножение растений. СПб.: С-Петерб. унта, 2002. - 232 с.

4. Биологическая энциклопедия. Применение антибиотиков в растениеводстве. -2010. hhh;//academic/ru.

5. Болтенков Е.В. Культура клеток — альтернативный способ сохранения и использования дальневосточных видов Iris L. // Докл. 2 Всероссийской конференции «Проблемы региональной экологии». Томск, 2000 - С. 150.

6. Болтенков Е.В. Изучение особенностей культивирования in vitro тканей дальневосточных видов рода Iris L. (Iridaceae) для использования в биотехнологии. Автореф. дис. .канд. с.-х. наук. — Владивосток, 2002.

7. Болтенков Е.В., Зарембо Е.В. Регенерация и каллусогенез в культуре in vitro тканей органов цветка видов рода Iris L. (Iridaceae) II Изв. РАН Сер. биол, 2005. — №2.-С. 174-179.

8. Бутенко Р.Г. Культура изолированных тканей и физиология морфогенеза растений. М.: Наука, 1964. - 272 с.

9. Бутенко Р.Г. Индукция морфогенеза в культуре тканей растений. Гормональная регуляция онтогенеза растений. М., 1984. - С. 42-54.

10. Бутенко Р.Г. Биология клеток растений in vitro и биотехнология на их основе. -М.: ФБК-ПРЕСС, 1999: 160 с.

11. Вяль Ю.А. Особенности онтоморфогенеза Belamcanda Chinensis (L.) DC (Iridaceae) в условиях интродукции в пензенской области. [Текст]/ Н.Г. Мазей, Г.Ф. Можаева, В.Р. Булатова. – Бюллетень Брянского отделения РБО, 2014 № 2(4). – С. 3–8.

12. Васильев А.Е., Воронин Н.С., Еленевский А.Г., Серебрякова Т.И. Ботаника. Анатомия и морфология растений. М.: Просвещение, 1978. - 478 с.

13. Вечернина H.A., Таварткиладзе O.K., Клементьева Л.А., Долганова З.В. Особенности регенерации и размножения растений рода Iris (Iridaceae) in vitro II Раст. ресурсы, 2004. T.40.,- Вып.4. - С. 56-64.

14. Доронькин В.М. Систематика рода Iris L. {Iridaceae Juss.) Азиатской России // Роль ботанических садов < в сохранении ^ биоразнообразия растительного мира Азиатской России: настоящее и будущее. Новосибирск, 2006. - С. 101-103.

15. Журавлёв Ю.Н., Омелько A.M. Морфогенез у растений in vitro. II Физиология растений, 2008. Т. 55. - № 5. - С. 643-664.

16. Зарипова A.A. Разработка технологии клонального микроразмножения пиона уклоняющегося: Paeonia anómala L.: Дис. . .канд. биол. наук. — Уфа, 2006. 181 с.

17. Зайцев F.H. Математика в экспериментальной ботанике. М.: Наука, 1990. -296 с.

18. Катаева Н.В. Клональное микроразмножение растений. М. Наука, 1983.97с.

19. Козицкий Ю.Н. Культура тканей в цветоводстве // Цветоводство, 1981. №5. -С.16.

20. Корнацкий С.А. О проблеме роста регенерантов при клональном микроразмножении // Повышение эффективности садоводства в современных условиях. Материалы Всероссийской научно-практической конференции -МичГАУ, 2003. Т.2. - С. 330-335.

21. Кравец B.C., Колесников Я.С., Кузнецов В.В., Романов Г.А. Регуляторы роста растений: внутриклеточная гормональная регуляция и применение в аграрном производстве // Физиология растений, 2008. — Т.55. С. 629-640.

22. Кренке Н.П. Регенерация растений. Л.: Изд-во АН СССР, 1950. - 674 с.

23. Лунева Л.С. Размножение ирисов (Iridaceae) методом культуры апикальных меристем in vitro //Ботанический журнал, 1977. Т. 62. - С. 416-421. "

24. Лунева Л.С. Строение и биология вегетативных почек ириса (.Iridaceae) //Ботанический журнал, 1977. Т. 62 - С. 563-568.

25. Митрофанова О.В., Иванова H.H. Получение безвирусных клонов луковичных цветочных культур // Бюлл. Никитского бот. сада, 1987. Вып. 62. -С. 37-41.

26. Молчанов Е.Ф., Соболева Л.Е., Митрофанова О.В. Микроразмножение редких декоративных растений // Цветоводство -1984. №5. - С. 13-14.

27. Мухаметвафина A.A. Регенерация in vitro Lilium regale Wils. II Актуальные проблемы биологии и экологии. Тезисы докладов 9 Молодежной научной конференции. Сыктывкар, 2002. - С. 102-103.

28. Нам И.Я. Оптимизация применения регуляторов роста и развития растений в биотехнологиях in vitro: Дис. .д-ра. биол. наук. Москва, 2004. - 314 с.

29. Николаенко Н.П. Жизнь корневища ириса // Цветоводство, 1962. № 2. -С.16-18.

30. Полевой В.В. Фитогормоны. Л.: Изд-во Ленингр. ун-та, 1982. - 248 с.

31. Родионенко Г. И. Ирисы. Л.: Агропромиздат. Ленинград, отд-ние, 1988. -159 с.

32. Родионенко Г. И. Систематические обзоры и новые таксоны // Ботанический журнал. 2009.- №3.- С. 423-433.

33. Терещенков А. Сибирские ирисы. // В мире растений. 2002. - №2. - С. 32-36.

34. Шевелуха B.C., Калашникова Е.А. Лабораторно-практические занятия по сельскохозяйственной биотехнологии. Методические указания. М.: МСХА, 1996 -80с.

35. Эсау К. Анатомия растений. М.: Мир, 1969. - 564 с.

36. Ahmad Al-gabbiesh, Dhia S. Hassawi, Fatma U. Afifi. In vitro propagation of Endagered Iris Species //Journal of Biological Sciences, 2006. № 6 (6). - P. 10351040.

37. Boltenkov E.V., Rybin V.G, Zarembo E.V. Flavones from callus tissue of Iris ensata II Chem. Nat. Compd, 2005. -№ 41.-P. 539-541.

38. Charlebois D., Richer C. Multiplication in vitro de syringe vulgaris Katherine Havermeyer et Charles Joli. Can. // J. Plant Sei, 2004. Vol. 84. - № 1. - P. 219-2122.

39. Hussey G. Cloning higher plants from aseptically cultured tissues and cells // J. Exp. Bot, 1975. V. 26. - № 12. - P. 253-262.

40. Hussey G. In vitro release of axillary shoots from apical dominance in monocotyledonous plantlets // Ann Bot London, 1978. Vol. 25. - P. 1323-1325.

41. Hussey, G. In vitro propagation of monocotyledonous bubles and conns // Plant tissue culture. Tokyo: Marzuzen, 1982. - P. 677-680.

42. Jehan H., Courtois D., Ehrey C., Lerch K., Petiard V. Plant regeneration of Iris pallida Lam. And Iris germanica L. via somatic embryogenesis from leaves, apices and young flowers// Plant Cell Reg. 1994. - Vol.13. - P. 671-675.

43. Jevremovic S., Radojevic L., Subotic A. In vitro morphogenesis of dwarf irises // Floriculture, Ornamentals, and Plant Biotechnology: Advances and Topical Issues. -2006a. Vol. II. - P. 551-557.

44. Kawase K, Mizutani H, Yoshioka M, Fukuda S. Shoot formation on floral organs of Japanese iris in vitro II Journal of the Japanese Society for Horticultural Science, 1995.-Vol.64.-P.143-8.

45. Randolph L.F. Embryo culture of Iris seed. // Bull Am Iris Soc. -1945. Vol. 98. -P. 33-45.

46. Schmulling Т., Schafer S., Romanov G. Cytokinins as Regulators of Gene Expression//Physiol. Plant. 2007. Vol. 100. - P. 505-517.

47. Yabuya Т., Yavagata. Embryo growth and Cultural Condition in Iris ensata Thumb. // Japan J. Breed. 1981. Vol. 31 (4). - P. 377-382.

48. Yabuya T, Ikeda Y., Adachi T. In vitro propagation of japanese garden iris iris ensata Thunb. // Euphytica. 1991. Vol. 57. - P. 77-82.

49. Lilien-Kipnis H. Bud regeneration from inflorescence exsplants for rapid propagation of geophytes in vitro II Plant Cell Reports. 2000. Vol. 19. - P. 845-850.

50. Ziv M., Naor V. Flowering of geophytes in vitro. II Propagation of Ornamental Plants. 2006. Vol. 6. -№ 1. - P. 3-16.



Информация о работе

Тип: Дипломная работа
Страниц: 84
Год: 2019
2900 p.
Не подошла эта работа?

Узнайте стоимость написания
работы по Вашему заданию.
ПОСМОТРЕТЬ ЦЕНЫ
Оформление заявки БЕСПЛАТНО и
ни к чему не обязывает.
Закажите авторскую работу по Вашему заданию!
Контрольная работа
от 100 p.
cрок: от 1 дня
Реферат
от 600 p.
cрок: от 1 дня
Курсовая работа
от 1000 p.
cрок: от 3 дней
Дипломная работа
от 6000 p.
cрок: от 6 дней
Отчет по практике
от 1000 p.
cрок: от 3 дней
Решение задач
от 150 p.
cрок: от 1 дня
Лабораторная работа
от 200 p.
cрок: от 1 дня
Доклад
от 300 p.
cрок: от 2 дней
Отзывы наших клиентов
Алексей
Спасибо большое! Материал по теме и быстро, хотя Qiwi подтупил с транзакцией. Удачи!
Станислав
Очень признателен за своевременное выполнение работ, исправление делаются вовремя, грамотные специалисты. Молодцы! Думаю,что будем сотрудничать в дальнейшем
Ирина
Первый раз пользовалась услугами этого сайта и осталась очень довольна. Сам сайт нашла случайно, когда искала готовую работу. Работу скачала сразу после оплаты. Рекомендую!
Иван
здравствуйте! спасибо Вам огромное за контрольную работу.
Заказать работу очень просто!
Вы оформляете заявку
Получаете доступ в лк
Вносите предоплату
Автор пишет работу
Получаете уведомление
о готовности
Вносите доплату
Скачиваете готовую
работу из лк
X
X